长链非编码RNA-AK145056在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及分子机制研究

Myocardial ischemia/reperfusion injury (MI/RI) is a common complication after revascularization therapy and its molecular mechanisms are still not completely understood. Long noncoding RNAs(lncRNAs) are defined as RNA molecules with length more than 200nt and lacking the ability for protein-coding which are proven to play important roles in epigenetics . In preliminary experiment ,We were excited to find the expression of lncRNA-AK145056 is upregulated extensively in I/R injured heart in mice and it can induce HL-1 cell apoptosis. Then, We infer AK145056 plays an important regular role in occurrence and development of MI/RI and select out its potential target molecules Tnfaip3、Bex4、lhh、Cysltr1. Based on these, we will explore four aspects in vivo and vitro as follows:(1)Observating expression of AK145056 in MI/RI.(2) Testing the role of AK145056 (3)Revealing the target molecules AK145056 in MI / RI.(4) Clarifying through which pathway AK145056 involved in MI/RI by its target molecules. This study will further reveal the mechanism of MI/RI and may provide new idea and therapeutic target for MI/RI.

心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)是血管再通术后常见的并发症，其机制不清。长链非编码RNAs（lncRNAs)是一类长度超过200nt，在表观遗传学起重要作用的非编码RNA。前期研究,我们发现lncRNA中的AK145056在MI/RI中显著升高且能诱导HL-1心肌细胞凋亡，我们推测AK145056在MI/RI的发生、发展中起重要调节作用，并且筛选出其潜在靶分子Tnfaip3、Bex4、lhh、Cysltr1。本项目将在此基础上，拟通过细胞、动物在以下4方面展开研究：（1）明确MI/RI过程中AK145056表达规律；(2）观察AK145056在MI/RI中的作用；（3）确定AK145056的靶分子；（4）探讨AK145056通过靶分子参与MI/RI中的信号通路。本项目将进一步揭示MI/RI的发生机制，为其有效防治提供新思路和药物作用的新靶点。

背景/目的：长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）最近是一个研究热点，然而很少有研究探讨其在心脏缺血再灌注损伤(MI/RI)的作用。本研究重点MI/RI过程中lncRNA的表达变化及其作用。尿路上皮癌相关1（UCA1）是最近发现的一种长链非编码RNA（lncRNA），我们研究了其在MI/RI中的作用。.方法：用结扎大鼠冠状动脉前降支的方法建立MI/RI模型。用免疫组织化学和DHE染色方法检测细胞凋亡与心脏组织活性氧（ROS）的产生。采用基因芯片检测lncRNA的表达谱并用实时荧光定量PCR验证其表达变化。用MTT法和流式细胞仪检测细胞活力和细胞凋亡。.结果：MI/RI显著诱导大鼠模型细胞凋亡和ROS生成。基因芯片检测显示UCA1表达减少，而qPCR进一步验证其表达是下降的。实验进一步表明UCA1参与H2O2诱导的细胞凋亡， UCA1与p27的表达呈负相关，p27过度表达可诱导原代心肌细胞凋亡。.结论：MI/R可以减少UCA1的表达，UCA1减少可以增强p27的表达，P27表达增强可以促进细胞凋亡进而加重MI/RI,UCA1可能在MI/RI中起重要的作用。