油茶抗炭疽病细胞表型的诱发和电泳选择

本研究根据林木抗病生理生化机制，利用病原菌素诱发细胞抗病表型，电泳选择抗病育种细胞，建立抗病单细胞克隆，为林木抗病育种提供了快速有效新技术。1.分离、纯化和培养油茶炭疽病菌C.camelliae ，制备和纯化C.camelliae毒素。2.由油菜C.oleifera幼嫩组织诱导愈伤组织。制备悬浮单细胞，建立细胞悬浮培养系统。3.将C.camelliae毒素加入单细胞悬浮培养物中50-100ug/L，诱发油菜细胞抗病表型，抗病型细胞Ph由≥7转变为≤5.2。4.用电技术分离和选择抗病表型细胞，抗病表型细胞携带电荷多，迁移速率大，在400V电场中电泳70-90分钟，收集率先泳向阴极细胞，选出4个抗病细胞系。5. 经缓冲培养建立抗病单细胞克隆。6.检测碱滴度、β-糖苷酶、苯丙氨酸解氨酶皆显示抗病性生化特征。