羊布鲁氏菌otpR和cpk基因功能的系统鉴定

布鲁氏菌是引起人和牛羊猪等动物布病的病原体，人们对其致病机理和生物学特性了解还远不足以指导布鲁氏菌病防治。近年本室通过转座子插入技术发现该菌otpR基因突变后毒力和体内生存能力大大降低，又通过基因缺失技术构建了otpR基因标记缺失株，表型检测发现该缺失菌株除毒力降低外，对温度、pH和渗透压等因素高度敏感。但进一步基因组分析发现布鲁氏菌otpR基因和cpk基因是同一操纵子内的两个不同基因，otpR基因删除可能影响cpk基因功能，因此早期观察otpR缺失株毒力降低，以及对温度、pH和渗透压等敏感的真正原因是来自otpR？cpk？还是两个基因共同作用？为此，本研究试图通过非极性基因删除技术构建otpR缺失株、cpk缺失株、otpR+cpk双基因缺失株，并将其分别与野生菌株和基因互补菌株在不同应激因素作用下进行表型比较和体内外毒力检测，解读otpR和cpk基因的功能及布鲁氏菌的分子致病机理。