沉香中结香真菌分布特点及其成香机制研究

Agarwood，is a kind of as expensive and rare medicinal material and perfume widely used in China. Aquilaria sinensis is the unique resource of Chinese agarwood. It always take a few years or decades for high quality agarwood formation. Fungi have been commonly considered functioning in agarwood formation to accelerate the formation course and improve agarwood quality. In our previous study on fungi isolation, through identification and function screening from A. sinensis, 4 strains were obtained which can promote agarwood formation and improve agarwood quality. Therefore, in the present application, we aimed to establish effective molecular identification methods for specific fungi strains,to explore the distribution characteristics of agarwood-producing fungi in different wood layers of A. sinensis after different time of agarwood formation and to detect the changes of metabolites of agarwood-producing fungi and main substances produced by wood. Finnally we want to elucidate the mechanism of fungi in accelerating agarwood producing and to know what is the role of endophytic fungi in the agarwood formantion. Additionally, through further studies on different forms of inocula in fungi inoculation for agarwood producing, such as the fungal mycelium, fungi culture liquid and its condense powder, the high efficient method for agarwood producing was expected to develop. This study will provide the basis for high quality agarwood. of A. sinensis

沉香是名贵的药材、熏香和香料。白木香是我国唯一的沉香来源植物。质量高的沉香一般需要几年甚至几十年以上方能形成。通常认为真菌在沉香形成过程中起重要作用，不仅可以加速沉香的形成，而且形成的沉香质量较好。课题组前期对沉香形成过程中的真菌进行了分离、鉴定及功能筛选，获得了4株能够加速结香且所结沉香质量优的菌株。本项目拟在此基础上，通过建立有效的特定菌株分子鉴定方法，检测结香真菌在沉香形成过程中不同时间段、不同树干层中的时间和空间及量上的分布特点，测定结香菌株产生的代谢产物和树干本身的主要物质变化，最终明确真菌在沉香形成过程中的作用机制。另外，通过以微生物菌丝、培养液及其浓缩粉不同形式接种白木香，探索微生物促进沉香形成的方式，为利用微生物促进高品质沉香奠定基础。

白木香Aquilariasinensis(Lour.)是珍贵国产药材沉香的唯一植物资源。沉香为白木香含树脂的木材，具行气止痛，温中止呕，纳气平喘之功效。健康的白木香植株不能产生沉香类物质，只有受到物理伤害、化学伤害或真菌侵染后才诱导结香。本项目以4株结香真菌为材料，检测了结香菌株在沉香形成过程中的分布特点，探索了结香真菌促进结香的机制，为利用微生物促进高品质沉香形成提供借鉴。通过实施获得以下结果：（1）建立了4株结香菌株的PCR检测方法，其中2个菌株为可可毛色二孢（Lasiodiplodia theobromae），另外2个菌株分别为拟层孔菌（Fomitopsis meliae）和硬孔菌(Rigidoporus vinctus）。（2）采用高通量测序法测定了4株结香菌株在沉香形成过程中的4个分层、不同来源的树种、不同地区的沉香、结香及未结香的白木香、白木香结香前后、不同年份的沉香中的分布，拟层孔菌菌株和硬孔菌菌株在测定样品中均未检测到，而 可可毛色二孢的两个菌株在腐烂层、结香层、过渡层和白木层呈递增趋势，其中Lasiodiplodia在白木层中数量最多。越南产沉香树种A. banaensae中的分布较中国产沉香树种白木香中分布多，并以白木层分布居首；结香前结香真菌的数量也比结香后的数量多。（3）从白木香样品中采用PDA培养基分离出110株真菌，结香真菌L. theobromae 共88株，为样品中的优势菌株并证明能促进结香。在海口产的样品中，硬孔菌(Rigidoporus vinctus）从第二层到第五层均有分布且有结香功能。（4）结香真菌菌丝及发酵液能诱导沉香的形成。（5）结香真菌代谢产物及代谢产物萃取物能促进沉香的形成。（6）结香代谢产物的茉莉酸成分可能是主要诱导沉香形成的主要成分之一。