体外Micro-RNA模型的建立以及Micro-RNA对靶mRNA翻译阻抑机制的研究

siRNA和miRNA是最近发现能够调控基因表达的两类小RNA。其中由机体产生的miRNA在生物发育和生命进化中有着重要的意义。目前有关miRNA的作用机制尚不清楚，为了更好的研究miRNA的作用机制，本课题将参考体外RNAi的方法，建立研究miRNA的体外模型，并在此模型的基础上进行miRNA作用机制的研究。我们已经设计了针对绿色荧光蛋白EGFP基因的一些miRNA。利用稳定转染绿色荧光蛋白MCF-7细胞株对合成的双链RNA进行筛选和鉴定，初步的实验结果表明G4能够特异有效的降低细胞内绿色荧光蛋白的表达，但并不降低细胞中靶mRNA的水平。因此我们拟在体外RNAi模型的基础上，以EGFP和G4为研究对象，引入体外翻译系统建立体外miRNA模型。并在此模型基础上探索参与miRNA对靶基因翻译抑制过程的相关分子，并对其功能进行研究。这将对深入了解miRNA的作用机制有着重要的推动作用。