CXCR7配体依赖的细胞间通讯在口腔白斑发生与癌变中的作用及机制研究

细胞间调控参与了口腔白斑发生与癌变过程，我们的前期研究提示，这不仅是由于细胞间直接交换信息的间隙连接通讯功能缺陷，而且还存在趋化因子/趋化因子受体这样的间接传递信息方式的功能异常。初步研究结果表明，CXCR7蛋白在口腔白斑及浸润癌中表达显著升高，CXCR7是近期才鉴定出的CXCL12、CXCL11的新受体，然而，CXCR7及其配体在口腔白斑发生与癌变中的作用仍未明确。我们提出以下假设: CXCR7配体依赖的细胞间通迅参与了口腔白斑发生与癌变过程；CXCL12、CXCL11/CXCR7轴及其下游信号通路调控了细胞的恶性表型、促进了细胞上皮-间质转化。为此，本项目拟分析CXCR7及其配体在口腔白斑发生与癌变中的表达特点及变化规律；了解CXCR7配体的来源、作用方式；明确配体活化CXCR7后所产生的生物学效应及细胞内信号通路的变化。旨在为阐明口腔白斑发生与癌变机制提供新的重要证据和防治新靶点。

根据与基金委签定的项目资助计划书, 本项目完成了研究内容,获得了相关的重要研究成果。细胞间调控参与了口腔白斑发生与癌变过程，趋化因子/趋化因子受体是细胞间间接传递信息的重要方式。对正常口腔黏膜、口腔白斑（口腔癌前病变）、口腔鳞状细胞癌组织做差异基因表达分析时，我们发现白斑及浸润癌组织中，存在趋化因子/趋化因子受体的表达异常，特别是 CXCR7表达显著升高，随后的荧光定量QRT-PCR也验证了这样的结果；组织的免疫组化分析发现趋化因子受体CXCR7、CXCR4及其配体CXCL12/CXCL11表达异常与口腔白斑发生、癌变过程密切相关。采用siRNA干扰口腔鳞癌细胞SCC15的CXCR7表达和（或）应用AMD3100抑制CXCR4受体激活后，加入外源性CXCL12配体，探讨CXCL12-CXCR4/CXCR7轴在口腔鳞癌中的作用机制。成功筛选出有效的CXCR7的 siRNA干扰片段，抑制SCC15细胞CXCR7蛋白表达。外源性CXCL12可促进SCC15细胞的迁移、侵袭能力，这种促进作用可能与CXCL12-CXCR4/CXCR7轴有关。应用拮抗剂AMD3100阻碍CXCR4与CXCL12结合和（或）siRNA干扰抑制CXCR7的表达后， SCC15细胞的增殖、迁移和侵袭能力均被抑制，结果提示CXCL12-CXCR4/CXCR7轴可促进口腔癌细胞的增殖和运动能力。此外，我们的研究还发现：（1）维甲酸（retinoic acid, RA）可下调CXCL10、IL32的表达；RA可以阻滞OSCC细胞周期，抑制细胞生长; 还可通过调节角蛋白的表达而影响口腔鳞癌细胞的分化。（2）维甲酸可能通过上调Cx32、Cx43的表达，增强细胞间隙连接通讯功能。（3）在4NQO诱发大鼠舌背部形成白斑模型中发现，成纤维细胞活化产生的IL-1α可能在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用。（4）抗真菌药物克霉唑可以抑制口腔癌的增殖，可阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡。