转录抑制因子HBP1在前列腺癌放疗中的作用及其机制

HBP1(HMG盒蛋白1)是一种重要的转录抑制因子，抑制许多生长调节基因和癌基因的表达。我们前期研究发现HBP1在前列腺癌细胞及前列腺癌组织内表达量降低。HBP1表达量的高低与前列腺癌组织的Gleason评分及预后相关，高表达HBP1的前列腺癌DU-145细胞对射线的敏感性高于对照细胞。因此HBP1极可能在前列腺癌的放疗中起重要作用。研究内容：1、比较不同HBP1基因表达水平的前列腺癌细胞株对放射线的敏感性的差异；2、观察不同HBP1水平的前列腺癌细胞裸鼠荷瘤之间放疗敏感性的差异；3、明确临床前列腺癌组织标本HBP1的表达水平与放疗效果的关系；4、研究HBP1是否通过诱导凋亡引起放疗对前列腺癌细胞的杀灭作用；5、利用ChIPSeq技术筛选HBP1在放疗中起诱导凋亡作用的关键靶基因。最终阐明HBP1在前列腺癌放疗中的作用及其机理。

背景：目前治疗前列腺癌，放射性粒子永久植入治疗前列腺癌逐步替代前列腺癌根治术和去势术，成为治疗前列腺癌的主要手段之一。但是，前列腺癌放疗抵抗的机制尚不明确。本研究的方向是研究如何减少前列腺癌细胞对放疗的抵抗及增加肿瘤细胞对放疗的敏感性。而前期研究结果提示：HBP1（HMG盒蛋白1）很有可能在前列腺癌放疗抵抗过程中起重要作用。.主要内容：.1．建立了不同HBP1基因表达水平的前列腺癌稳定表达细胞株。 .2．通过MTT试验和直接细胞计数比较不同HBP1基因表达水平的前列腺癌细胞株对放射线的敏感性。发现在4Gy高剂量照射后，四种的细胞存活率均出现进行性下降，其中pBaBE –HBP1-DU-145细胞的存活率下降较其他三种细胞下降明显（32%）。HBP1基因表达水平调高可以提高放射线造成的短期杀伤效应，或者说可以降低前列腺癌细胞的放射抵抗性。.3．通过流式细胞仪和Western blot实验发现pBaBE –HBP1-DU-145细胞的凋亡率较其他三种细胞增高。同时，pBaBE –HBP1-DU-145细胞照射后，其凋亡蛋白caspase-3表达活性增加。.4. 比较不同荷瘤裸鼠对放疗的敏感性的不同。该部分未完成。.5．通过分析前列腺癌病人近距离放疗疗效与HBP1表达量之间关系。发现 前列腺肿瘤组织中HBP1表达高低与放疗疗效之间呈正相关，HBP1表达量低者，预后较差。.6．利用基因芯片技术，筛选出WNT3A基因表达具有差异性意义，可能是HBP1在前列腺癌细胞放疗中调控的下游基因。.7．通过本课题经费支持，我们研究发现了来氟米特（LEF）能够在体外实验中增强5-氟尿嘧啶对于肾癌细胞的杀伤作用。.结论：1. HBP1在前列腺癌细胞中具有加强放疗杀伤效果的作用。2.WNT3a为HBP1在前列癌细胞中加强放疗杀伤效果的下游基因。..