Midkine通过Notch信号通路对急性胰腺炎损伤后修复的作用机制

Acute pancreatitis patients will suffer the delayed repairment of the pancreatic tissue, characterized as endocrine and exocrine impairment, especially in severe acute pancreatitis. A significant increase of Midkine mRNA was found in the gene chip assay in the pancreas during the recovery phase in an animal model of acute pancreatitis, indicating a potential role of Midkine in the repairment of pancreatic tissue after the acute injury. After the administration of recombinant Midkine protein, we found this protein can effectively promote the recovery of the pancreas during acute pancreatitis. Therefore, the aim of this study is to further investigate the role of Midkine in the injury and recovery of the pancreas and to explore the possible molecular mechanism. The problems to be solved: (1) to clarify the role of Midkine in the injury and recovery in the pancreas. (2) to elaborate the possible mechanism: Midkine may promote the recovery of the pancreas after the acute injury through the interaction with the Notch signaling pathway. (3) to test the potential therapeutic effect of recombinant midkine in the pancreatic impairment.

急性胰腺炎患者，特别是急性重症胰腺炎患者，在经过治疗后往往会出现不同程度的胰腺修复不良的现象，主要表现不同程度的胰腺内外分泌功能不足的现象。在成功建立胰腺损伤和修复动物模型的基础上，我们的基因芯片研究显示中期因子（Midkine）在此过程中存在显著的表达升高，提示该基因可能参与胰腺的损伤修复过程。在使用重组人Midkine蛋白的基础上，我们发现Midkine蛋白可以明显促进胰腺损伤后的修复过程。因此，本研究将结合前期工作，对于Midkine在胰腺损伤修复过程中的作用及分子机制予以深入研究。拟解决:（1）明确Midkine在胰腺损伤和修复过程中的作用；（2）阐述Midkine促进胰腺修复可能是通过Notch信号通路；（3）探讨重组人Midkine蛋白在治疗胰腺炎损伤和修复模型的动物模型的可能性。

1．项目的背景 .胰腺炎患者会存在胰腺修复不良的现象，主要表现为胰腺内外分泌功能不良。针对胰腺损伤和修复的基础性研究，将为胰腺炎的治疗提供新的可能途径。前期研究结果显示伴随胰腺的损伤和修复过程中出现Midkine基因呈现出现明显上升，而使用重组人中期因子（rhMidkine）后能够显著促进小鼠模型的胰腺损伤后的修复。Notch信号通路在急慢性胰腺炎中的参与和作用机制的是目前的研究热点，其在胰腺再生中的作用也日益受到关注。目前对于中期因子(Midkine)与Notch信号通路之间相互关系的研究不多。有研究显示Midikine可能作为Notch信号通路的上游分子，对该通路存在激活作用。基于已有的文献报道和前期的研究结果，我们假设在AP胰腺损伤和修复过程中，Midkine可以有效促进胰腺外分泌腺的修复，并且此过程可能是通过激活Notch-2信号传导通路来完成的。.2．主要研究内容.2.1 观察Midkine蛋白在恢复期SAP患者血清中的表达，并研究其与胰腺外分泌功能的相关关系。.2.2 建立胰腺损伤和修复动物模型，检测Midkine及其受体在RNA水平和蛋白水平的表达趋势。.2.3 在动物水平，对AP造模动物注射重组Midkine蛋白进行干预，观察给予Midkine蛋白对胰腺损伤修复有何影响。.2.4 在动物水平观察Midkine蛋白干预后，胰腺内Notch信号通路有何改变.2.5 分离胰腺腺泡细胞，在细胞水平观察Midkine对腺泡细胞生长和死亡的作用，并验证Midkine对Notch信号通路的影响。.3．重要结果.3.1 Midkine蛋白在胰腺炎中表达升高。.3.2重组Midkine蛋白促进胰腺损伤修复。.3.3 重组Midkine蛋白通过Notch信号通路促进腺腺泡细胞。.4．其科学意义.4.1本研究以Midkine调节胰腺腺泡细胞修复过程为研究中心，旨在阐述Midkine通过与Notch信号通路的交互作用促进胰腺外分泌腺的修复。.4.2本研究旨在阐述Midkine促进胰腺损伤后修复的分子机制，并在此基础上探讨重组人Midkine蛋白对胰腺损伤修复模型的治疗作用的可能性，为胰腺损伤后修复的“对因治疗”提供理论依据，为今后的临床试验提供动物实验数据。