谷氨酸递质及其受体在电针改善帕金森病模型大鼠运动症状中的作用及机制研究

本组以前的研究证实电针能有效改善帕金森病（PD）模型大鼠的运动症状，但对纹状体内多巴胺含量无明显影响。据此，我们提出电针对皮质-基底节环路中谷氨酸传递异常的调控可能是电针改善PD运动症状的基础，而特异性谷氨酸受体则是电针调控的重要靶点的假说。本研究拟通过脑内微透析结合高效液相的方法，实时动态监测皮质-基底节环路中谷氨酸等递质的释放，分析电针对递质的平衡调节效应。采用形态学、分子生物学手段检测谷氨酸受体的分布及表达，寻找电针调控的特异性谷氨酸受体靶点；给予特异性谷氨酸受体的激动剂或阻断剂后检测模型大鼠的运动症状、递质释放和受体表达变化，以证实电针作用的靶点。神经电生理信号的记录用来反映相关核团的功能，以明确电针对谷氨酸介导的神经元活性的调节；以及采用脑片钳方法进一步研究特异性谷氨酸受体对谷氨酸能突触传递的调节作用，以明确受体调控的真正机制，可为电针防治PD提供理论依据和新的思路。

皮层-基底节环路中谷氨酸系统的传递异常是帕金森病的一个重要病理特征，尤其是投射到纹状体的谷氨酸能活动显著增加。采用6-OHDA制备的单侧损伤PD大鼠模型，给予电针治疗发现100 Hz电针刺激可以明显缓解了PD大鼠的异常旋转行为并增加了其平衡运动时间。然而，电针刺激对黑质致密部（SNc）的酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数目、纹状体内TH阳性纤维的表达以及纹状体内的DA含量都没有显著影响，表明电针对PD的调节存在着非DA重构的效应。.　　对于谷氨酸系统的检测发现，电针刺激4周后显著降低了纹状体内谷氨酸的释放，这种纹状体内谷氨酸释放量和动物自主活动呈显著相关。对于代谢性谷氨酸受体尤其是第Ⅱ型mGluR受体检测发现，电针刺激能显著升高损伤侧mGluR3亚型的表达水平。并且，纹状体内给予Ⅱ组mGluR 受体特异拮抗剂APICA后，逆转了EA对PD模型运动行为的改善作用。这些结果提示电针确实可以影响到纹状体内谷氨酸投射的异常活动。.　　另外，电针刺激能够影响PD大鼠运动皮层的局部场电位（LFP）和峰电位活动，这些变化与给予L-Dopa治疗后引起的放电类似。离体脑片电生理实验显示，给予第Ⅱ型mGluR阻断剂（APICA）后增加了mEPSC频率但并未影响其电流幅度，说明APICA调节Glu的释放是突触前机制。.　　综上所述，电针可通过对基底节神经环路中神经递质Glu的调节，作用于突触前的谷氨酸受体来调控基底节通路的平衡而发挥治疗作用，可为进一步探究针灸作用于环路内的特定调控靶点和通路奠定基础。