金思维对APPV717I转基因小鼠脑内Tau蛋白过度磷酸化及其SUMO通路的影响

Tau蛋白的过度磷酸化是AD 的核心病变，SUMO化和去SUMO化的失衡是tau蛋白过度磷酸化的关键环节，是AD发病机理中Aβ淀粉样级联反应的下游机制。本课题将在观察金思维有效部位组合物对APPV717I转基因小鼠行为学变化、海马神经元病理改变（神经元、突触、神经纤维缠结）、Tau蛋白磷酸化水平（Tau、PHF-1）、主要蛋白激酶（GSK-3β、cdk5）和蛋白磷酸酯酶（PP 1、PP2A）的影响基础上，进一步观察对SUMO修饰化途径相关蛋白（SUMO-1、UBa1、UBC9）表达的影响，从行为学、病理形态及分子水平探索金思维影响Tau蛋白过度磷酸化相关调控因素的作用机制，为金思维防治AD的临床应用提供新的依据。

Tau蛋白的过度磷酸化是AD的核心病变，SUMO化和去SUMO化的失衡是tau蛋白过度磷酸化的关键环节。本课题在观察金思维有效部位组合物对APPV717I转基因小鼠行为学变化、海马神经元病理改变、Tau蛋白磷酸化水平、主要蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的影响基础上，从行为学、病理形态及分子水平探索金思维影响Tau蛋白过度磷酸化相关调控因素的作用机制。研究采用3月龄APPV717I转基因小鼠，分为模型组、盐酸多奈哌齐组和金思维大、中、小剂量组，连续给药8个月，得出以下结论：.(1)减少脑内总tau蛋白含量，减少异常磷酸化tau蛋白含量：金思维各剂量组均可减少APPV717I转基因小鼠脑内总tau蛋白含量，金标准盐酸多奈哌齐组与GEPT大剂量组的疗效相似。说明GEPT可通过减少脑内总tau蛋白含量来治疗AD，并且可能存在剂量依赖性。.(2)减少周期蛋白依赖性激酶-5（cdk5）及糖原合成激酶3-β（GSK-3β）表达水平，减少tau蛋白的异常磷酸化：应用各剂量GEPT治疗后cdk5均明显下降，与多奈哌齐组含量相似。金思维能有效地减少APPV717I转基因小鼠脑皮质内的GSK-3β表达水平，并且给药8个月的疗效明显优于给药４个月。说明GEPT可能通过减低cdk5及GSK-3β含量来控制tau蛋白的异常高度磷酸化，但疗效并不随着剂量的增大而增加。.(3)增加小鼠脑内神经元蛋白磷酸酶2A（PP2A）表达水平，增加P-tau蛋白的去磷酸化：金思维小、中、大剂量组小鼠能增加海马神经元PP2A表达，且疗效接近金标准药多奈哌齐组。.(4)增加突触前后相关蛋白的表达，改善突触结构，改善学习记忆能力：金思维给药4个月和8个月时都能改善APP转基因小鼠海马CA1区的突触结构，包括突触数量增加，突触界面曲率变大，突触前活性带长度和突触后致密区厚度增加。提高APPV717I转基因小鼠的空间学习记忆能力。.以上结果揭示了中药补肾活血化痰法治疗AD具有减少脑内总Tau蛋白含量，增加磷酸化tau的去磷酸化相关酶的表达，减少tau蛋白异常磷酸化酶的表达，从而具有多靶点抑制脑内磷酸化Tau水平，改善小鼠学习记忆能力。.该成果先后获得国家科学技术进步奖一等奖1项、北京市科学技术奖一等奖1项、发表论文6篇，在SCI收3篇，培养博士研究生5名，硕士研究生7名，参编《中国痴呆诊疗指南》一部。