高发区基于EB病毒抗体联合循环肿瘤细胞筛查早期鼻咽癌体系的建立以及流行病学研究

Serum antibodies against Epstein-Barr virus (EBV)-related antigens have been widely used as screening markers for nasopharyngeal carcinoma (NPC); then for all the subjects in the high-risk group, endoscopy and pathological biopsy are performed to diagnose NPC. However, the reported positive rate of EBV antibodies is 3% to 10% in high-incidence population, while the NPC patients just account for 1.5% to 3.3% in EBV+ high-risk population. The effectiveness of NPC screening remains relatively low. The current studies show that circulating tumor cells (CTCs) are presented in all stages of NPC, and the positive rate of CTCs is 66.7% to 96.6%. Almost 100% of the NPC patients in Southern China are EBV positive. Taking advantage of this feature, we establish the test scheme of distinguish the real NPC CTCs. Based on NPC screening cohort “National NPC early detection and treatment base (Wuzhou city)”, this project will try to establish a new screening model of EBV antibodies and CTCs-based combination for the early detection of NPC, and perform the epidemiological research of the relationship between CTCs with demographics, lifestyles and risk factors in high-incidence population. The project aims to investigate the feasibility of the CTCs test for screening and early detection of NPC and improve the positive detective rate of diagnostic tests, which provide the important bases for early stage NPC screening in high-incidence areas.

目前鼻咽癌筛查采用EB病毒抗体检测为初筛手段，高危人群进一步做鼻咽镜检查和组织活检确诊。在高发区人群EB病毒抗体阳性率为3%~10%，最终病理确诊的鼻咽癌仅占EB病毒抗体阳性高危人群的1.5%~3.3%，筛查效能相对较低。研究显示循环肿瘤细胞(CTCs)在全部分期鼻咽癌患者中均可检出，阳性检出率为66.7%~96.6%。由于高发区鼻咽癌患者肿瘤细胞中几乎100%潜伏感染EB病毒，项目组利用此特性建立了鉴定外周血中鼻咽癌CTCs的技术体系。本项目拟依托国家鼻咽癌早诊早治示范基地（梧州市），在标准筛查模式的基础上，建立基于EB病毒抗体联合CTCs筛查早期鼻咽癌的体系，对CTCs与高发区人群的人口学资料、生活方式和危险因素的相关性等方面进行流行病学研究。探讨将CTCs用于鼻咽癌早期诊断和筛查的可行性，提高诊断性检查阳性患者检出率，对于鼻咽癌高发区人群筛查的实施和推广有着重要的理论价值和实际意义。

鼻咽癌是上皮来源的恶性肿瘤，具有独特的流行特征。加强鼻咽癌的二级预防（早期发现、早期诊断和早期治疗）是鼻咽癌防治工作的重要一环，是提高鼻咽癌治愈率、获得良好预后的关键。本研究建立了外周血鼻咽癌循环肿瘤细胞（CTCs）分离技术体系以及形态学标准。研究发现鼻咽癌患者CTCs与EB病毒DNA载量、T分期和M分期呈正相关。与标准的EB病毒VCA-IgA / EBNA1-IgA筛查模式相比，采用基于EB病毒抗体联合CTCs筛查鼻咽癌模式可以有效提高阳性预测值，但敏感性较低，限制其在高发区人群筛查的实际应用。此外，我们还发现与正常体重/体型相比，确诊时超重或肥胖可以降低鼻咽癌患者全因死亡率和病因特异性死亡率，而较瘦体型与死亡率的增加相关；可能是由于BMI较低和体型较瘦的鼻咽癌患者放疗依从性较差造成的，可能需要更多的临床关注，以确保更好的营养和治疗耐受性，从而改善这组患者的生存结果。同时，我们还发现3个失巢凋亡相关基因（CDC25C、E2F1和RBL2）和PAX5基因与鼻咽癌患者生存率、临床分期、肿瘤微环境免疫细胞浸润和EB病毒基因表达密切相关，并通过体外实验验证相关基因在临床组织样本和细胞系中的表达，为鼻咽癌预后生物标志物和潜在功能靶点的研究提供了新的见解。我们还分析了鼻咽癌患者和健康对照人群的血浆脂质谱，发现EB病毒感染可能通过调节肿瘤细胞和外周血中的脂质代谢来影响鼻咽癌的发病风险和预后。