重用赤芍治疗淤胆型肝炎的物质基础和作用机制研究

Based on the trend of high-dose use of Chinese herbs, this study focuses on the clarification of scientific nature of high dose of Radix Paeoniae Rubra (150g) on cholestasis hepatitis, which was created by Professor Wang Chengbai on theory of cholestasis hepatitis with blood stasis and inner heat. It was a successful model of the application of heavy dosage of tranditional Chinese medicine. Its theory origin and pharmacological study have perviously been reported. However, the material basis and relevant mechanism of high dose of Radix Paeoniae Rubra on cholestatic hepatitis is still unclear. This study focuses on changes of material basis and mechanism of dosage-effect relationship of Radix Paeoniae Rubra on cholestasis hepatitis through: (1) establish dosage-effect curve in cholestatic hepatitis pathology model; (2) make clear the main medical components of Radix Paeoniae Rubra with methods of Chinese materia medica serum pharmacochemistry and the behavior in vivo including time, concentration, distribution of the components by pharmacokinetics of traditional Chinese medicine; (3) the changes of molecular mechanism of Radix Paeoniae Rubra. This study would clarify the scientific nature of high dose of Radix Paeoniae Rubra (150g) on cholestasis hepatitis, provide useful information for proper application of high-dose use of Chinese herbs, and create a new mode of elucidating the dosage-effect relationship of Chinese herbs.

基于目前中药大剂量应用趋势，以重用赤芍治疗淤胆型肝炎为研究对象。赤芍治疗淤胆型肝炎用量高达150g，是我国中西医结合肝病专家汪承柏教授基于"血瘀发黄"理论创立，其理论渊源及药理学研究已见较多报道。但是，为什么要重用赤芍治疗淤胆型肝炎？其科学依据一直缺乏研究。本项目拟建立不同剂量赤芍在淤胆型肝炎病理模型上的"量-效"关系曲线；应用中药血清药物化学方法明确赤芍治疗淤胆型肝炎的主要药效成分；再应用药物代谢动力学方法观察不同剂量赤芍主要药效成分的体内行为（时间、浓度、分布）变化；参考文献，应用分子生物学技术考察不同剂量赤芍在淤胆型肝炎病理模型上分子生物学机制的差异；综合分析，找出赤芍治疗淤胆型肝炎量效关系的物质基础和作用机制变化，为阐明重用赤芍治疗淤胆型肝炎提供科学依据，为中药量效关系研究特别是中药大剂量应用研究提供新思路和方法。

目前中药存在大剂量应用趋势，我国中西医结合肝病专家汪承柏教授基于“血瘀发黄”理论创立的“重用赤芍治疗淤胆型肝炎”中赤芍的用量高达150g，临床疗效确切。但是，为什么要重用赤芍治疗淤胆型肝炎？其科学依据一直缺乏研究。本课题以赤芍为研究对象，围绕“临床-实验室-临床”研究策略，采用循证药学方法与临床研究手段，结合分析化学、分子生物学、代谢组学与网络药理学等多学科技术，明确重用赤芍治疗淤胆型肝炎的科学内涵。（1）文献梳理：采用循证药学方法，明确了大剂量赤芍作为主要药物治疗淤胆型肝炎的有效性与安全性。（2）体外化学成分分析：通过主要成分含量测定、化学指纹图谱分析、化学组分鉴定，考察了赤芍主要成分的变化规律和化学成分信息。（3）药物代谢动力学研究：考察了赤芍主要效应成分可能为芍药苷和芍药内酯苷，推测赤芍大剂量应用可能与主要效应成分生物利用度低有关。（4）量效关系：从药效学层面，验证了赤芍治疗淤胆型肝炎具有明显的量效关系，且证实了量效关系的主要效应成分为芍药苷。（5）作用机制：采用分子生物学方法，考察了不同剂量赤芍水提物及芍药苷治疗淤胆型肝炎对AKT-NRF2-GSH抗氧化通路、炎性小体及NF-κB相关通路以及NTCP、BSEP、MRP2等转运蛋白的作用，阐明了赤芍治疗淤胆型肝炎的生物学机制；采用代谢组学与网络药理学方法，探究了赤芍的代谢特征标志物、特征作用靶点及信号网络，进一步验证了重用赤芍治疗淤胆型肝炎的物质基础和生物学机制。（6）前瞻性临床试验：再次证实了重用赤芍治疗淤胆型肝炎的临床疗效，验证了前期作用机制研究结果。总之，本课题以“凉血活血重用赤芍”治疗淤胆型肝炎为切入点，将客观真实存在的宏观效应深入到物质基础及作用机制层次，多方位阐释了重用赤芍治疗淤胆型肝炎的科学内涵，为重用赤芍的临床应用提供了理论依据与直接指导。