以病毒衣壳为靶标的新型抗乙型肝炎病毒先导化合物的发现

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种严重传染病，与肝硬化和肝癌的发生密切相关。我国处于乙型肝炎的高流行区，慢性乙型肝炎已成为我国突出的公共卫生问题之一。然而，现有治疗药物不但种类少而且存在副作用或耐药性的问题。核苷类药物的耐药性问题，使得寻找新的抗HBV药物，特别是新作用机制的抗HBV药物的任务变得尤为迫切。病毒衣壳因其在病毒复制过程中的重要作用和为病毒所特有的性质，有望成为新的抗HBV药物靶标。本项目欲在前期的研究工作基础上，以已获得的活性化合物为模板，采用基于配体的先导化合物发现策略，通过构建药效团模型，对小分子化合物库进行虚拟筛选，同时结合早期发现毒理学和结构生物学的技术方法，对获得的潜在活性化合物进行ADME/T性质预测和作用机制研究，以期快速有效地获得以病毒衣壳为靶标的新结构类型的高效低毒化合物，为新作用机制的抗HBV药物研究奠定基础。

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种严重传染病，与肝硬化和肝癌的发生密切相关。我国是乙型肝炎的高流行区，慢性乙型肝炎已成为我国突出的公共问题之一。然而，现有的治疗药物主要为核苷类DNA聚合酶抑制剂，如拉米夫定、恩替卡韦、阿德福韦酯、替诺夫韦等，以及免疫调节剂α-干扰素。不但种类少，且核苷类药物存在长期使用易产生耐药性的问题。寻找和发现新的抗HBV药物，尤其是具有全新作用机制的抗HBV药物对解决当前核苷类药物的耐药性问题具有重要意义。.本项目利用计算机辅助药物设计技术，进行了基于配体的药物设计。通过对已知活性的二氢嘧啶类（HAPs）化合物的结构特征分析，运用计算机辅助设计软件，建立了药效团模型；依据生物电子等排，官能团转换，化学键饱和度转变等药物设计原理，对HAPs类化合物进行结构转换和骨架替换，运用DS的Library Design模块构建了虚拟化合物库，获得数十万个不同结构母核的虚拟化合物；运用ADMET Predictor对获得的虚拟化合物进行了吸收、分布、代谢、毒性等性质的预测，剔除具有潜在毒性及ADME参数不佳的化合物；运用DS的Pharmacophore模块，通过前期建立的药效团模型，对获得的虚拟化合物库进行虚拟筛选，并挑选出匹配值高的不同母核的化合物200余个进行了合成；建立了非天然氨基酸m-氨基环己甲酸和溴代苯丙氨酸单体的合成方法；首次报道了“一锅法”合成具有广泛生物活性的取代苯酞类化合物的方法；建立了光学纯HAPs类化合物的可工业化生产的合成方法，并对其关键中间体进行了单晶培养，获得其构型的关键数据，并最终确定了HAPs药物的绝对构型，扫除了HAPs类药物研究过程的合成障碍；最终获得目标化合物150余个，结构均得到核磁和质谱的确证；运用HBV转染的HepG2.2.15细胞对得到的目标化合物进行了体外活性评价，发现十余个化合物在体外表现出良好的抗病毒活性（IC50<10μM），其中，溴代苯丙氨酸类化合物与HAPs类阳性对照药作用相当，且具有更好的选择指数，有进一步研究开发的价值；对新结构类型化合物的构效关系进行了初步总结，为下一步的结构修饰与优化提供了参考依据。.本项目的研究结果，对解决当前抗HBV药物临床用药的耐药性问题，缓解我国社会和乙肝患者的经济压力，促进我国抗HBV药物创制水平的提高具有具大的意义。