过表达XIAP与铜代谢失衡：铜剂抗癌机制研究

铜是人体必需的微量元素其代谢平衡对机体至关重要。研究发现肿瘤病人体内存在铜代谢紊乱，我们在前期工作中发现癌症病人血清总铜显著高于常人，升高主要原因是铜蓝蛋白结合铜升高。有报道X染色体连锁的凋亡抑制基因(XIAP)是细胞内铜的感受器，它直接或间接影响细胞内COMMD1、ATP7A/ATP7B、CTR-1等铜转运体的蛋白表达，其过表达于多种肿瘤细胞株及肿瘤组织中，并被认为与肿瘤的耐药有关。 铜可通过与XIAP结合，促进XIAP的降解。因此我们提出肿瘤中XIAP过表达可能在肿瘤机体铜代谢失衡中发挥中心调节作用，而铜剂可能通过与肿瘤细胞XIAP结合并促进其降解，在转录后水平发挥抗瘤作用。本项目拟通过荷瘤动物实验及体外细胞培养实验进行验证。该项研究有助于阐明肿瘤病人体内铜代谢紊乱的机制，为临床肿瘤病人微量元素平衡饮食提供参考；同时也可明确铜剂抗癌的机制，为提高化疗药物敏感性及临床抗癌治疗提供新思路。

铜是人体必需的微量元素，其代谢平衡对机体至关重要。研究发现肿瘤病人体内存在铜代谢紊乱。XIAP细胞内铜感受器，可直接可间接影响细胞内铜转运相关蛋白的表达。本课题围绕铜转运蛋白及铜代谢展开研究。体内研究结果表明，肿瘤生长过程中，伴机体铜代谢紊乱，给药铜剂可抑制肿瘤生长，但不影响正常肝组织中铜代谢。体外细胞学实验结果表明，氯化铜处理肝癌细胞，可引起XIAP、CTR1、APT7B 表达降低，并呈时间及剂量依赖性，而COMMD1 表达随铜剂作用时间及剂量的升高而增高。本课题同时铜检测方法进行了改良，将超声透析与石墨炉原子吸收结合，用PBS溶液对血清或组织匀浆液透析可测得非蛋白结合铜（FCu），用EDTA溶液对血清或组织匀浆透析可测得蛋白疏松结合铜。并将其应用于临床血样研究，结果表明，肝癌患者血清总铜显著高于健康者（P<0.05），但其血清FCu及EXCu却显著低于健康者（P<0.05）；宫颈癌患者虽血清总铜与健康者无显著差别，但其血清FCu及EXCu也显著低于健康者（P<0.05）；肝炎患者则相反，患者血清总铜水平偏低，但其FCu及EXCu却显著高于健康者（P<0.05）。此外，我们发现，血清FCu与EXCu呈正相关，说明两者之间可能处于动态平衡，并随着病理生理状况而发生改变。临床病理研究表明，铜转运相关蛋白ATP7B在肝癌组中的阳性表达率为73.2%，显著高于正常肝组织（33.3%）(P<0.05)。增高的ATP7B表达与癌细胞分化程度显著相关(P<0.05)，高中低分化癌组织阳性表达率分别为62.5%、66.7%及92.3%。COMMD1在肝癌组中的阳性表达率显著低于正常肝组织(P<0.05)。减少的COMMD1表达与癌细胞分化程度及TMN临床分期显著相关(P<0.05)。DMT1在肝细胞癌组中的阳性表达率为78.9％，显著高于正常肝组织(20％)(P<0.01)，并且高中低分化癌组织中DMT1的阳性表达率分别为71.4％、76.2％及86.4％。随着癌组织分化程度的降低，DMT1的表达逐渐升高，但增高的DMT1表达与TMN临床分期或肿瘤是否有血管浸润均无关(P>0.05)。