GC碱基特异替换技术的建立和AlbD酶的体外进化

为解决富含GC碱基基因在异源寄主中表达低和野生型基因受自然界进化制约，其表达产物的活性、特异性、溶解性、pH、温度等在实际应用中受到限制的问题，本项目欲通过dITP介导的PCR诱变系统建立一套新的体外定向分子进化技术平台- - GC碱基特异替换技术，这一技术的建立不仅可解决富含GC基因在异源寄主中表达受限的问题，而且可广泛用于富含GC基因的体外改良和蛋白质结构与功能的研究，对我国酶制剂、多肽药物、疫苗等生物技术产业将产生积极影响，有巨大的潜在经济效益。同时，本研究试图利用该技术对具有多底物活性且有广泛应用前景的albD基因进行体外改良，在研究结构与功能关系的基础上，深入了解AlbD对不同底物的作用机制，开拓该基因在抗病和酯酶工业中的应用潜力。