基于分子印迹聚合物固相微萃取－亲水液相色谱分离的氨基糖苷类抗生素残留快速筛查技术研究

旨在发展食品中痕量氨基糖苷类抗生素残留的快速分析技术。基本思路是：以四种常见氨基糖苷类抗生素为主要研究对象，发展基于分子印迹聚合物涂层的固相微萃取纤维探针和毛细管微萃取器，实现对基体干扰杂质的有效去除及对目标对象的高选择性富集；根据氨基糖苷类分子高极性的特点，通过"点击化学"技术在温和条件下制备多种新型亲水性固定相，并结合前期发展的系列亲水性分离介质在亲水色谱模式（HILIC）下发展目标样品的高效分离方法；通过柱后衍生技术实现样品的高灵敏度荧光检测。在所构建技术平台基础上发展四种常见氨基糖苷类抗生素残留快速筛查技术，并有望拓展到其他同类样品的快速检测。

氨基糖苷类抗生素分子极性强，化学结构相似的固有特点使其分离和检测存在很大的挑战；另外，检测蜂蜜、牛奶或环境水体中痕量氨基糖苷类抗生素还存在基质复杂、干扰多、含量低等问题。针对上述问题，本项目通过在样品前处理、新型色谱固定相、分析方法构建三个方面进行了探索研究，发展出痕量氨基糖苷类抗生素残留的快速分析技术。在样品前处理方面，先后发展出(1) 以链霉素为模板分子的分子印迹聚合物吸附剂。对蜂蜜中四种氨基糖苷类抗生素表现出良好的选择性和富集效果；(2) 分别发展出聚乙二醇、聚马来酸、聚乙烯醇为涂层的固相微萃取纤维探针或毛细管微萃取器，对极性化合物表现出50-210倍的富集效果；(3) 分别发展出基于C18-弱阳离子（或弱阴离子）交换混合吸附剂的二维固相萃取新技术、石墨烯吸附剂。通过这些前处理技术有效解决了氨基糖苷类抗生素样品的富集和净化；为解决氨基糖苷类抗生素难以分离的缺陷，发展出几种新型极性色谱固定相：(1)聚乙烯醇涂覆于硅胶表面构建出核壳型亲水色谱固定相。该制备方法具有简单、绿色（无需有机溶剂），快速（1-2 h@>36 h传统法）的优点。该固定相表现出良好的色谱性能和宽pH适用范围（1-11）；(2)采用点击化学法合成出基于氨基酸为官能团的极性固定相，包括天门冬酰胺（弱酸性）、半胱氨酸（两性）、氨基型（弱碱性）。所发展固定相对包括氨基糖苷类抗生素在内的强极性样品分离提供了技术基础；在分离分析方法优化方面，在上述样品前处理和色谱固定相基础上，结合HILIC-MS/MS或HILIC-ELSD 等手段，详细考察了基质干扰效应、色谱分离条件和固定相保留机理等影响分析的关键因素，建立和发展出针对痕量氨基糖苷类抗生素样品的快速分析技术方案，同时所发展的技术还可拓展到其它强极性化合物的分离分析。