基于cAMP-CREB-BDNF信号通路的蒙医“镇赫依法”促进抑郁症海马神经元再生的作用及机理研究

To betel Shisan-Wei ingredients pill as a Mongolian "zhen heyi method" representative treatment depression obtained better curative effect on clinical treatment.But Mechanism of intervene depression is also blank.Research group find out that betel Shisan-Wei ingredients pill resist form change of Hippocampus of depression rats at the least,repair damaged Hippocampal organization at a certain exetent for treatment depression purpose at the earlier stage research. Now,the research indicated that cAMP-CREB-BDNF signaling which play key role on depression attacking play a important regulation function on regeneration of Hippocampus and cell apoptosis.So principle for the treatment of the "zhen heyi method",we choose betel Shisan-Wei ingredients pill,Copy the chronic stress depression rats model,Glu damaged the Hippocampus Neuron in depressive disorder cells model,as the regeneration of Hippocampus Neuron for breakthrough point,using Molecular biology、Flow cytometric technology etc,from whole-cell-molecule three levels,observing the regeneration of Hippocampus Neuron in depressive disorder role in promoting,clear the mechanism of betel Shisan-Wei ingredients pill on regeneration of Hippocampus Neuron in depressive disorder on the cAMP-CREB-BDNF signaling,preliminary expounds the specific acting targets and acting way of betel Shisan-Wei ingredients pill threatment the depression,promote the scientific basis for Mongolian "zhen heyi method" treatment depression.

以槟榔十三味丸为代表的蒙医"镇赫依法"在抑郁症的临床治疗中取得了较好疗效，但其干预抑郁症作用机制研究尚属空白。课题组在前期研究中发现，槟榔十三味丸至少是通过抵抗抑郁症大鼠海马神经元形态改变，一定程度修复受损海马组织而达到治疗抑郁症目的。现有研究表明，抑郁症发病中起关键作用的cAMP-CREB-BDNF信号通路对海马神经元再生和细胞凋亡发挥了重要调控作用。因此，我们以"镇赫依"为治疗原则选用槟榔十三味丸，复制慢性应激抑郁大鼠模型、Glu（谷氨酸）损伤抑郁症海马神经元细胞模型，以海马神经元再生为切入点，采用分子生物学、流式细胞仪等技术，从整体-细胞-分子三个层次，观察槟榔十三味丸对抑郁症海马神经元再生的促进作用，明确cAMP-CREB-BDNF信号通路在槟榔十三味丸调节海马神经元再生中的作用机制，初步阐明槟榔十三味丸治疗抑郁症的具体作用靶点和作用途径，为"镇赫依法"治疗抑郁症提供科学依据。

以槟榔十三味丸为代表的蒙医“镇赫依法”在抑郁症的临床治疗中取得了较好的疗效，但其干预抑郁症作用机制研究尚属空白。课题组在前期研究中发现，槟榔十三味丸至少是通过抵抗抑郁症大鼠海马神经元形态改变，修复受损海马组织而达到治疗目的。现有研究表明抑郁症发病中起关键作用的cAMP-CREB-BDNF信号通路对海马神经元再生和细胞凋亡发挥重要调控作用。课题组以“镇赫依”为治疗原则复制慢性应激抑郁大鼠模型、谷氨酸损伤抑郁症海马神经元细胞模型，以海马神经元为切入点采用分子生物学、流式细胞等技术，从整体-细胞-分子三个层次，观察槟榔十三味对抑郁症海马神经元再生的促进作用，明确cAMP-CREB-BDNF信号通路在槟榔十三味丸调节海马神经元再生中的作用机制，初步阐明槟榔十三味丸治疗抑郁症的具体作用靶点和作用途径，为“镇赫依法”治疗抑郁症提供科学依据。通过研究发现，①经过28天刺激后，与正常对照组相比，抑郁模型组大鼠水平穿越格数及竖立次数明显减低，糖水消耗量明显下降，表明动物出现了精神运动迟滞、兴奋性减低等症状。这与抑郁症患者的快感丧失、情绪低落等症状有相似性，提示抑郁模型复制成功，而槟榔十三味丸能明显改善抑郁模型大鼠的以上行为学异常。②槟榔十三味丸能显著增加抑郁模型大鼠海马齿状回DG、CA3区神经前体细胞，并上调海马和前额叶皮层AC、cAMP、PKA含量以及CREBmRNA和BDNFmRNA表达。③阻断剂实验中，与正常对照组相比模型组和阻断剂组、阻断剂+氟西汀组、阻断剂+槟榔十三味丸中剂量组cAMP含量均降低，与模型组相比氟西汀组和槟榔十三味丸中剂量组cAMP含量明显升高，表明槟榔十三味丸通过调节cAMP-CREB-BDNF通路而影响大鼠海马神经再生。④细胞实验中，与正常对照组相比谷氨酸损伤模型组海马神经元凋亡率显著增多，与损伤模型组相比阳药BDNF组、槟榔十三味丸低、中、高剂量组海马神经元凋亡率显著降低，表明实验中Glu损伤模型建立成功，槟榔十三味丸具有抗细胞凋亡作用。其含药血清显著增加海马神经元细胞CREBmRNA和BDNFmRNA的表达，进一步说明了槟榔十三味丸通过调节cAMP-CREB-BDNF通路而促进大鼠海马神经元再生。