新候选抑癌基因DLC2在乳腺癌中通过VEGF诱导肿瘤血管生成的机制研究

DLC2是新的候选抑癌基因，在乳腺癌中表达下调。前期研究中，我们首次发现DLC2与血管生成相关：在体内，DLC2基因敲除小鼠表现为较野生型小鼠有更强的血管生成能力；在体外，血管内皮细胞DLC2表达下调，促进内皮细胞黏附、迁移和血管样小管形成。但是，DLC2调控血管生成的机制仍未阐明。进一步的研究发现，在乳腺癌中沉默DLC2，VEGF表达升高。我们推测，VEGF可能作为核心机制参与DLC2调控血管生成。为证实这一设想，我们拟应用体内外血管生成功能实验和上下游表达调控实验，寻找VEGF参与DLC2调控血管生成的确切证据；同时研究RhoA/ROCK1/2通路在该过程中的作用；并制作乳腺癌组织芯片，探讨DLC2-RhoA/ROCK1/2-VEGF途径在乳腺癌预后判断和治疗指导方面的意义；为进一步阐明乳腺癌血管生成机制提供理论依据；并为乳腺癌抗血管生成治疗提供药物新靶点。

背景:.DLC2（deleted in liver cancer 2）是一个新的抑癌基因，在乳腺癌中表达下调。在前期研究中，我们发现并报道了DLC2的新功能：调控血管生成。相关研究结果已发表在Oncogene。但是，DLC2调控血管生成的机制仍未阐明。.方向和主要内容:.证实DLC2通过VEGF途径调控血管生成；阐明DLC2调控VEGF的途径和信号通路，进而揭示乳腺癌中DLC2调控血管生成的机制；探讨DLC2-VEGF途径在乳腺癌预后判断和治疗中的应用价值。.重要结果和关键数据:.1.获得了乳腺癌中DLC2调控VEGF表达，进而影响血管生成的确切证据。此为我课题组首次发现，国内外文献尚未见报道。.2.在乳腺癌中，DLC2参与调节细胞迁移、侵袭、黏附、克隆形成及细胞周期。.3.初步阐明了乳腺癌中DLC2调控VEGF的机制：主要通过RhoA/Rac-1通过调控VEGF，此外还有其他重要信号通路参与。.本项目中，我们着重对DLC2调控VEGF的机制进行了探索：我们发现RhoA为DLC2调控VEGF表达的关键途径，其下游调控分子主要为Rac-1，提示RhoA/Rac-1通路是DLC2调控VEGF表达的关键。其次，通过分析基因芯片检测结果，我们发现mTOR,MAPK,P53,focal adhesion等细胞信号通路也可能参与DLC2调控VEGF表达，这也是此项目的新发现，将为下一步研究提供新的思路和方向。.4.探讨了DLC2-VEGF通路在乳腺癌临床预后和治疗中的应用：DLC2低表达与乳腺癌组织学分级高、转移率高密切相关，提示DLC2在乳腺癌的发生、发展中起重要作用，DLC2可作为判定乳腺癌侵袭程度及其预后的参考指标。.科学意义：. DLC2作为一个新的抑癌基因，DLC2参与血管生成是我们前期研究首次发现并报道的，本项目进一步揭示了DLC2调控血管生成的具体机制，具有原创性和创新性；项目中，我们首次发现RhoA/Rac-1通路在DLC2调控VEGF表达中的作用，另外P53等重要通路也可能参与了此过程，初步了DLC2调控血管生成的重要机制，也为下一步研究提供了新思路；此外，DLC2低表达与乳腺癌组织学分级高、转移率高密切相关，提示DLC2可作为乳腺癌临床预后的参考指标和潜在的抗转移治疗分子靶标。