腺病毒介导CYP450基因转染间充质干细胞的靶向抗肿瘤效应

基于基因介导的酶前药治疗(GDEPT)策略，将含有化疗前药激活基因的重组腺病毒载体导入间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs），利用间充质干细胞向肿瘤靶向聚集的特性，在肿瘤区域激活化疗药物，实现对癌症的靶向治疗。我们拟从人肝脏组织克隆细胞色素氧化酶基因CYP2B6、CYP2E1cDNA，构建重组腺病毒载体，制备含目的基因高滴度病毒颗粒，转染正常人骨髓间充质干细胞。RT-PCR和Western Blot等方法检测CYP2B6、CYP2E1的表达；提取转基因间充质干细胞微粒体，检测转基因MSCs中CYP2B6和CYP2E1酶的生物学活性。体外检测携带CYP2B6、CYP2E1的双载体系统活化环磷酰胺\异环磷酰胺\达卡巴嗪的抗肿瘤效应；并将目的基因修饰间充质干细胞通过静脉注入人黑色素瘤的裸鼠模型体内，检测其体内联合化疗药物的抑瘤效应。