基于丹酚酸构效关系的抗血栓EDs类化合物的发现

In order to effectively carry out the drug discovery of salvianolic acids, we firstly studied and elucidated the structure-activity relationships (in vitro and vivo) of salvianolic acids, and proposed the integration of antioxidant group and (+)-phenyl lactic acid was the activity-premise of salvianolic acids. Based on this concept, we designed and synthesized the PDS and EDS series of compounds, which were evaluated via the molecular, cellular and animal model, and found the EDs compound showed improved liposolubility, antioxidant, anti-thrombosis effects, as well as displayed a prospect studied for the reduced bleeding risk. Next, we will use the EDs compound as the precursor, and further design and synthesize new series of EDs compounds to study their structure-activities of antioxidant, radicals scavenging, inhibition of endothelial cell apoptosis in vitro, followed by evaluating their anti-thrombosis and cerebral ischemia reperfusion injuries to obtain the pro-drug candidates of EDs analogues with enhanced oral bioavailability.

为了有效开展丹酚酸类成分的药物发现研究工作，课题组前期在阐明丹酚酸类成分体内外构效关系的基础上，提出抗氧化基团与(+)-苯基乳酸的有机融合是丹酚酸类成分活性保证的前提，并以此为药物设计理念，结合临床上的抗氧化药物，设计、合成了PDs和EDs两个系列化合物，然后经分子、细胞及整体动物模型评价，最终发现了脂溶性和相关药理活性如抗氧化、抗血栓等作用显著改善、且有降低出血风险研究前景的EDs类化合物。接下来，本课题拟以EDs化合物为先导物，全面深入的设计、合成新的EDs化合物，研究并阐明该类化合物的抗氧化、自由基清除、抑制内皮细胞凋亡构效关系及主要作用机制，再经体内抗血栓、脑缺血再灌注及生物利用度评价，以期寻找到机制明确、有效性和口服生物利用度提高的用于临床前深入研究的EDs候选物。

本项目前期基于对丹参中酚酸类成分体内外抗氧化和抗血栓活性构效关系的研究，提出抗氧化基团与(+)-苯基乳酸的有机融合可能是丹酚酸类成分活性保证的前提，并以此为药物设计理念，结合抗DPPH自由基清除、抗氧化、抗凝血活性实验，设计、合成并发现了初步具有降低出血风险研究前景和缺血再灌注损伤保护作用的EDs吡唑酮结构类化合物。之后，本项目针对血栓形成堵塞后复通引起的缺血再灌注损伤主要的两大关键病理特征氧化应激和炎症瀑布，同时结合EDs吡唑酮类药物如依达拉奉作为注射剂存在的水溶解性较差的成药性问题，在已有依达拉奉构效关系基础上，进一步通过药物拼合设计策略将抗炎活性药效片段引入吡唑酮结构类化合物，以期在保留抗氧化活性的同时增加该类化合物的抗炎活性（基质金属蛋白酶MMP-9抑制活性）和改善水溶性，并最终设计、合成了5种结构类型的吡唑酮类化合物共计102个。随后，系统评价了该类化合物的体外构效关系，并优选6个化合物在大鼠模型上依次对其抗血小板聚集、抗血栓、脑缺血再灌注损伤保护的活性进行研究，最终发现体内外活性与依达拉奉相当但水溶性显著改善的先导化合物AG-3-0。本项目工作为尝试探索如何解决目前临床所用抗血栓药物普遍存在的出血风险具有参考意义，同时也对临床缺血再灌注损伤药物依达拉奉的再开发具有较强的指导意义。但也必须指出的是，本项目的研究还存在较大的不足，例如尚未能真正发现抗炎活性（MMP-9活性）显著提高的先导物，未来在这个方向上仍有探索的空间。