减味寿胎丸的补肾安胎有效部位的药效学系统评价研究

针对生殖健康领域中医药的临床优势，以中医复方配伍理论和药效为原则，确定稳定、高效、可控的分离技术，获取去阿胶减味寿胎丸（菟丝子、桑寄生、续断）及各单味药的补肾安胎的有效部位，并同时进行HPLC-MS-MS检测结合多指标成分定量测定的模式，予以定量分析。以病-证结合模型和体外滋养细胞模型为研究载体，系统地研究减味寿胎丸的有效部位补肾安胎在维持孕卵发育、防治自然流产、改善整体肾虚证候以及对滋养细胞培养模型的作用，并与各单味药物的主要成分进行药效学比较，反向佐证有效部位层次的君臣佐使关系，通过多层次多模型的药效学比较，使补肾安胎药效作用更加突出，通过现代分离和检测手段，使复方质量更加稳定可控，药效物质基础和作用机理更加清晰，提高母胎用药安全性。

课题组提取减味寿胎丸复方及其各单味药进行鉴定，成功提取了减味寿胎丸及菟丝子、桑寄生、续断的总提物，并对菟丝子总黄酮及总多糖等有效成分进行分离，所提取的菟丝子黄酮含量为55.938%；总多糖平均含量为13.891%。首次对单味中药菟丝子不同有效成分提取物的不同剂量安胎药效进行系统对比研究。首次证明了桑寄生及其有效部位对肾虚-黄体抑制大鼠流产模型的安胎药效，建立人早孕绒毛滋养细胞模型并研究桑寄生总提物、总黄酮、总多糖对其的影响。桑寄生总提物高剂量、桑寄生总黄酮高剂量、桑寄生总多糖高剂量均能显著促进细胞增殖。各含药血清对细胞的作用呈剂量依赖性关系。桑寄生总提物高剂量、桑寄生总黄酮高剂量、桑寄生总多糖高剂量均能抑制细胞凋亡（培养24h及48h）。续断总提物能够提高血清雌激素水平、促进子宫、卵巢雌、孕激素受体的表达；续断总苷能够促进雌、孕激素受体的表达，续断总生物碱的作用可能与降低子宫平滑肌兴奋性有关，而与调整内分泌的关系不大。续断及各成分组对人滋养细胞增殖的促进作用明显低于减味寿胎丸组。续断总提物高剂量组及续断总苷高剂量组对人滋养细胞增殖有促进作用，其中，20%含药血清的作用与减味寿胎丸相似，48h的细胞周期变化较24h更加明显。