胃癌相关基因KIAA1199的表达调控机理及功能研究

KIAA1199 is one of the highly expressed and candidate prediction genes in gastric cancer screened out from expression profiling assay of our research group. It is a coding gene of a newly recognized 150kd protein of HUGE protein database. The initial research related to KIAA1199 was the mutations occurred in nonsyndromic hearing loss. More recently, research work related to KIAA1199 has been gradually reported in cancers. Previously, we carried out experiments of verification in our group. The microarray results were verified on KIAA1199 with Q-PCR; Immunohistochemistry assay showed the expression of KIAA1199 in gastric cancer was relatively higher than that in adjacent tissue, and the higher KIAA1199 expression was negatively related to the prognosis of patients, specially, the prognosis of those with nuclear expression was poorer than those with cytoplasm and nuclear/cytoplasm expression; It also indicated that inhibition of KIAA1199 expression could inhibit proliferation of gastric cancer cells using RNAi technology. Subsequently, we intend to expand sampling and verify the relationship between KIAA1199 expression and the clinicalpathological parameters and the prognosis of patients using immunohistochemistry, and then, gene transfection, RNAi,tumorigenicity experiments in nude mice and subsequent functional experiments on the biological characteristics of gastric cancer cells will be carried out; We will explore the regulation mechanism of its high expression in gastric cancer, and the regulation of down stream signaling pathways. Thus, we can give a comprehensive exposition of how KIAA1199 works in the tumorigenesis and development process of gastric cancer and its expression regulation mechanism，meanwhile,provide laboratory foundations for applications in clinical tests.

KIAA1199是课题组从胃癌基因表达谱中筛选出的一个胃癌高表达及胃癌预测候选基因，是HUGE蛋白质数据库中新识别的一个150kd蛋白的编码基因。最初发现该基因的突变与非综合症性耳聋的发生相关，近年在肿瘤中的研究渐有报道。前期我们用qRT-PCR法对芯片结果进行了验证，免疫组化亦显示KIAA1199在胃癌中的表达较癌旁组织高；高表达与患者的预后呈负相关，且核表达者的预后较浆及核/浆共表达者差；应用RNAi技术抑制其在胃癌细胞中的表达能够抑制胃癌细胞的增殖。本课题拟继续扩大样本，应用免疫组化、基因转染、RNAi、裸鼠体内致瘤实验及后续功能实验观察其在胃癌中表达的临床意义及对胃癌细胞生物学行为的影响，并对它在胃癌中高表达的可能原因和下游作用信号通路进行探讨，从而全面阐述KIAA1199在胃癌的发生发展过程中的作用及表达调控机理，并为其临床应用提供科学基础。

胃癌在我国恶性肿瘤中的死亡率高居第三位，严重危害人民健康。由于胃癌具有早期临床症状不明显、病程进展迅速等系列特征，导致其具有早期确诊率与根治性切除率低、术后复发率高、总体生存率较低等临床表现。因此，探究胃癌的分子发生机制对于临床靶向治疗具有重要的意义。. 近些年研究显示，KIAA1199 在结直肠癌、乳腺癌与口腔上皮鳞状细胞癌等多种高发性恶性肿瘤中均具有高表达特征，其异常高表达与癌症的触发、淋巴管浸润及淋巴结转移呈显著相关性。然而，KIAA1199在不同癌症中的生物学功能及分子发生机制却并不同一。目前，关于KIAA1199在胃癌中的生物学功能及分子调控机制尚未有相关报道。因此，本研究针对胃癌组织进行表达芯片检测，结果提示KIAA1199在胃癌中呈明显高表达水平。. 为进一步确定表达谱芯片结果，本研究对KIAA1199mRNA及蛋白质的表达水平进行检测。RT-PCR与免疫组化实验结果显示，KIAA1199在胃癌组织中呈显著性高表达水平。同时，根据321例胃癌组织KIAA1199mRNA的检测标本及123例胃癌组织KIAA1199蛋白质检测标本的临床资料分析，发现KIAA1199表达与侵袭深度、远处转移以及TNM分期具有显著相关性，且Cox 多因素回归分析证实KIAA1199作为一个重要的独立因素影响胃癌的发生。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，KIAA1199高表达水平病人的整体生存期极显著降低。. 根据临床病理分析结果，本课题以胃癌细胞为研究模型，探究KIAA1199在胃癌发生中的生物学功能及相关分子机制。结果显示KIAA1199可以促进胃癌细胞的生长，尤其是迁移及侵袭能力。介导该恶性生物学过程发生的主要分子机制之一是通过激活Wnt/β-catenin信号通路及上调基质金属蛋白酶家族（Matrix metalloproteinase, MMP）分子的表达水平，进一步触发上皮细胞间质转化过程的起始(Epithelial-to-mesenchymal transition ,EMT)， 最终导致迁移及侵袭过程的发生。本研究揭示了KIAA1199与胃癌发生的临床病理参数相关性、术后生存期的关系，首次探究KIAA1199在胃癌中的生物学功能以及其导致胃癌发生的相关分子机制。这一研究结果将对胃癌临床药物的研究与开发提供一定的理论基础。