转座子介导的斑马鱼抗寒相关基因克隆与功能研究

缺乏鱼类抗寒新品种是制约我国淡、海水渔业发展的重要因素之一。鱼类的抗寒性状涉及微效多基因，且其遗传调控机制复杂，因而杂交选育或转植抗冻蛋白基因的方法均未成功培育出抗寒的经济鱼类新品种。该申请项目将传统的杂交选育、现代分子遗传和基因工程育种等技术有机结合起来，旨在鉴定和克隆抗寒功能基因，建立经济鱼类抗寒育种的新模式，为阐明生物体的抗寒机理奠定基础。主要研究内容包括：1）利用SB转座系统对斑马鱼基因组实施高效和可诱导的插入突变，获得携带大量遗传突变的斑马鱼突变库，然后对突变库进行连续多代和多次的抗寒筛选，培育出具有强抗寒能力的品系。2）依据SB转座子的左右臂及其在基因组中连续移位后的"足迹"序列，克隆抗寒品系基因组中SB转座子插入位点的旁侧序列，经与斑马鱼基因组序列比较，鉴定与耐寒性状相关的功能基因和调控因子。该项目的实施与成功将为经济鱼类抗逆、观赏鱼体色和形态改变等育种提供技术平台。