新型固相介质的制备及其应用于流体连续多肽合成的探索研究

多肽固相合成中经常存在残缺肽，导致产物纯度低，是固相合成中亟待解决的问题。本项目针对传统的微球固相介质在多肽合成中存在的一些不足，尝试设计和开发一种整体聚合物介质应用于流体连续多肽合成，通过提高介质通透性和机械强度，加快流体对流传质，提高了缩合速率；以原子转移自由基聚合方法（ATRP）在介质孔道表面接枝聚合两种带有聚乙二醇（PEG）链段的单体，控制接枝链长及两种单元比例，起到消除聚合物基质效应、提高介质取代度和抑制多肽分子间形成氢键的作用，实现介质取代度和多肽分子纯度同时提高。以困难序列多肽为评价模型，系统研究接枝链长、链组成、介质的孔隙率、比表面积和孔径大小等因素对多肽合成效率的影响，探索整体介质对于减少残缺肽产生的机理，得到整体介质在流体连续多肽合成应用中的一般规律，实现快速、高效、批量多肽合成，并为整体介质应用于规模化多肽合成提供理论指导。

本项目主要针对多肽固相合成过程中产生序列残缺从而导致产物纯度低的问题，从设计一种整体聚合物介质入手，系统地开展了该类型介质应用于多肽合成中的规律性研究，完成了预期目标。1.设计和开发一种高交联度的、抗溶胀的聚乙烯基苄氯与乙二醇二甲基丙烯酸酯共聚(PCMS-EDMA)整体柱，系统研究了单体与交联剂比例和反应组分与致孔剂体积比对柱体形貌、孔径尺寸及分布、通透性、耐溶剂程度的影响，得到了各反应因素与柱体结构及性能之间的规律性认识，建立了制备高通透性和耐溶胀性的整体柱的关键制备技术；2.介质孔道表面修饰衍生功能化研究，采用电子转移活化的原子转移自由基聚合方法(AGET ATRP)在介质孔道表面接枝聚合带有聚乙二醇(PEG)链段的两种单体(聚乙二醇丙烯酸酯 PEGA; 单甲氧基聚乙二醇丙烯酸酯 mPEGA)，建立ATRP引发亲水性单体在多孔固体孔道表面接枝聚合的关键技术，准确控制接枝聚合物在介质孔道表面的数量，研究了接枝链长与整体柱的传质及载量之间的规律，创新搭建了流体连续合成装置设备，基于该装置建立了在线柱上羟基卤化、胺化、偶联linker的高效键合技术；3.整体介质在流体连续多肽合成应用中的规律性研究，采用疏水性强的困难序列多肽(酰基载体蛋白片段65-74，ACP 65-74)作为评价模型，系统研究了接枝链长、接枝链组成（包括均聚PEGA、嵌段共聚PEGA-mPEGA及二者嵌段比例）、柱体通透性、流体速度等因素对多肽合成效率的影响，阐明了整体介质对于减少残缺肽产生的机理，得到整体介质在流体连续多肽合成应用中的一般规律，实现快速、高效、批量多肽合成，并为整体介质应用于规模化多肽合成提供理论指导。完成论文7篇，其中发表期刊论文4篇，接收2篇，投稿1篇，会议论文3篇，申请专利7项，授权两项。