MEP1A促进肝细胞癌转移的作用和机制研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most prevalent malignant neoplasms with an increasing incidence and mortality worldwide. In our previous study, we first identified the frequently positive expression of MEP1A in HCC tissues by RT-RCR and immunohistochemical staining. We also demonstrate that expression of MEP1A in HCC is well-correlated with multiple malignant clinico-pathological characteristics and was strongly associated with tumor recurrence and patient survival. Overexpression of MEP1A promotes HCC cells invasion and metastasis in vitro and in vivo. Based on these findings, we hypothesise that MEP1A could promotes HCC cells invasion and metastasis through remolding ECM and legend shedding other cytokines，such as EGF、TGF α. We will combine the clinical sample analysis and experimental studies to explore the mechanism of MEP1A in promoting metastasis of HCC.

我们在前期实验中，首次发现MEP1A基因在部分肝癌组织中上调，并与患者转移相关的临床病理特征呈正相关，且显著影响肝癌患者的复发及生存；进一步动物模型和体外实验表明：上调MEP1A能促进肝癌细胞迁移和侵袭。然而MEP1A促进肝癌细胞转移的具体机制尚不清楚。结合相关背景及前期研究，我们推测 MEP1A 可通过对 ECM 的重塑、因子EGF和TGF α脱落作用等多个途径调控组织微环境，激活EFGR及ERK通路，从而促进肝细胞癌的转移。因此，本课题拟结合临床标本、动物模型及相关抑制剂，探讨MEP1A促进肝癌细胞转移的分子机制及其潜在的治疗价值，为肝癌的研究和治疗提供新思路。

在本项目资助下，我们明确了MEP1A促进肝癌细胞侵袭转移的作用，并且挖掘其作用机制和探索MEP1A的临床应用价值。我们初步验证了Th1细胞因子的靶向细胞巨噬细胞和CD8+T细胞在在肝癌患者中的表达情况，结果显示，在MEP1A高表达患者中，其巨噬细胞和CD8+T细胞的标记蛋白相应降低。高通量测序结果发现，金属基质蛋白酶12（MMP12）与MEP1A显著相关，用FOXP3标记肿瘤相关T细胞，发现MMP12的表达与FOXP3显著正相关，这提示MEP1A能减少淋巴细胞招募。另外，也观察到MEP1A调控代谢微环境的作用。基因富集分析结果发现，MEP1A与离子通路活动和糖胺聚糖结合显著相关。在代谢重排的过程中，糖基化修饰发挥重要功能。例如P53的糖基化可降低糖酵解进而抑制肿瘤生长。我们的测序结果也显示MEP1A与离子通路活动相关的基因中，钠钾ATP调节酶FXYD3可促进蛋白糖基化，而蛋白糖基化与肿瘤的发生密切相关。但是，FXYD3影响的下游蛋白尚不清楚。单羧酸转运蛋白4（MCT4）和葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）分子表达情况所反映的肿瘤环境代谢微环境状况。乳酸外排通过乳酸激活的转录因子HIF1α发生，该因子诱导GLUT1，LDH-A和单羧酸酯转运蛋白，特别是MCT4。维持糖酵解需要通过一组单羧酸转运蛋白从细胞中连续排出乳酸。在此过程中，MCT4促进短链碳水化合物的运输，以维持细胞内pH值和糖酵解。综合以上结果，我们认为MEP1A可能通过调节FXYD3表达影响MCT4/GLUT1的糖基化。因此，我们进一步提出假设认为MEP1A可能透过调控代谢微环境减少淋巴细胞的招募，进而促进肝癌细胞的侵袭和转移。我们也应用临床样本验证MEP1A作为预测因子的价值，并发现索拉菲尼联合HAIC治疗HCC合并门静脉侵犯患者的生存率优于单用索拉菲尼且安全性可控。这些研究结果为我们后期探讨联合MEP1A指导个体化治疗的可行性和提供临床参考依据，奠定了一定的基础。我们分析总结了前面的实验结果，并在包括Jama Oncology、CardioVascular and Interventional Radiology和 Journal of Vascular and Interventional Radiology国际知名期刊发表标注本项目资助的论文共10篇，培养博士后1名、11名博士研究生和3名硕士研究生。