强脉冲光作用于睑板腺腺上皮细胞治疗睑板腺功能障碍的机制研究

Intense pulsed light (IPL) is a promising therapy of Meibomian gland dysfunction (MGD), which is able to improve the gland secretion and have a long effective maintenance. It is possible that IPL upregulates the cell viability and function of meibomian gland epithelial cell (MGEC) though photomodulation effect. The applicant has proved the long-maintaining effect of IPL on MGD patients. Besides, there are published evidences that the upregulation of Notch1 signaling pathway improves the cell viability and function of MGEC, and non-interference light is able to upregulate the Notch1 signaling pathway in other kind of cell. Based on these evidences, the applicant speculates that IPL possibly upregulates the Notch1 signaling pathway and then induces the increasing of cell viability and function to treat MGD by working on MGEC. In order to support clinical practice, the applicant plans to illustrate the mechanism of IPL treating MGD though MGEC in zoological and cytological level.

强脉冲光是目前新兴的睑板腺功能障碍的治疗手段，能够改善睑脂分泌并具有长效性。目前有观点认为，强脉冲光可能是通过光调作用刺激睑板腺腺上皮细胞的活性及功能从而达到治疗效果，但仍缺乏直接的证据支持。申请人在前期工作中已证实了强脉冲光对睑板腺功能障碍患者的长期治疗效果。结合已有有力文献证实Notch1信号通路上调能够改善睑板腺腺上皮细胞的活性及脂质生成，且非干涉光源能够调控其他类型细胞Notch1信号通路的表达上调等证据，申请人提出科学假说：强脉冲光是直接作用于睑板腺腺上皮细胞，上调Notch1信号通路细胞活性及脂质生成功能，进而达到长期的治疗效果。申请人计划从动物学以及细胞学实验的不同层面，结合先进分子生物学技术，阐明强脉冲光作用于睑板腺腺上皮细胞从而治疗睑板腺功能障碍的机制研究，对临床治疗提供支持及指导。

【背景】强脉冲光（Intense Pulsed Light，IPL）能够改善睑脂分泌并具有长效性。文献证实Notch1信号通路上调能改善睑板腺的活性及脂质生成，且非干涉光源能够调控其他类型细胞Notch1信号通路的表达上调，因此IPL可能是通过光调作用刺激睑板腺腺上皮细胞的活性及功能从而达到治疗效果，但仍缺乏直接的证据支持。.【研究内容】本课题从动物学层面结合先进分子生物学技术，首先确定合适的动物模型，分别通过弗氏完全佐剂（Complete Freund's Adjuvant，CFA）和盐酸奈唑啉（Naphazoline Hydrochloride，NH）在C57BL/6小鼠上诱导睑板腺功能障碍（Meibomian Gland Dysfunction，MGD）模型，并评估两种动物模型对IPL的反应性；选取合适动物模型后，通过测定IPL治疗后的MGD小鼠的Notch1相关受体及配体，对Notch1与IPL治疗MGD的相关性进行研究，并在此基础上讨论光刺激后信号通路上调的变化，最终阐明IPL作用于睑板腺腺上皮细胞从而治疗MGD的机制。.【结果】两组小鼠分别通过CFA及NH诱导MGD模型成功后，经IPL治疗3次，CFA组内IPL与非IPL干预组睑板腺分泌能力无显著差异；NH组内在3次IPL干预后，IPL干预组的分泌能力评分显著低于非IPL干预组（p＜0.01）。NH组内的IPL干预组在3次治疗后，分泌能力评分显著低于CFA组内的IPL干预组（p＜0.01）。选取反应较好的NH模型并进行3次IPL治疗后，IPL组的分泌能力评分显著低于对照组（p＜0.01），且Notch1（NICD）、配体Jagged1的mRNA 水平在IPL治疗组的表达显著高于对照组（p＜0.01），IPL组NICD、DLL1、DLL3、DLL4、Jagged1、Jagged2的免疫组化可见，间质内、腺泡周围及导管内大量阳性表现；对照组经γ分泌酶抑制剂特异性阻断Notch1通路并进行3次IPL治疗后，NICD、DLL1、DLL3、DLL4、Jagged1、Jagged2的免疫组化结果显示，仅间质细胞见少量阳性表现。.【结论】CFA和NH均能诱导小鼠MGD形成。NH模型的可逆性比CFA模型更好。Notch1信号通路参与了IPL治疗MGD作用。