小鼠糖尿病db/db模型中3-氧酸辅酶A 转移酶的酪氨酸硝基化修饰

已有充分的实验证据表明，糖尿病不同组织的线粒体蛋白质酪氨酸硝基化的修饰普遍增高。线粒体基质蛋白3-氧酸辅酶A 转移酶(SCOT)是酮体代谢的重要限速酶，其功能异常会直接影响组织的能量代谢，特别是心脏组织。通过STZ诱导的大鼠糖尿病，Murad实验室已证实SCOT在心肌组织线粒体中酪氨酸硝基化修饰显著增加，而其活性降低。然而，有关SCOT酪氨酸硝基化修饰以及修饰蛋白质的酶动力学特征的研究并没有充分展开。在本项目中，我们选用db/db 小鼠糖尿病动物模型检测SCOT的酪氨酸硝基化的修饰状态及生物活性，运用质谱技术鉴定发生该修饰位点，进而利用定点突变技术，进一步确定这些位点以及对应的酶动力学改变。同时，我们将采用iNOS基因定位表达技术，试图分析细胞线粒体内高NO应力对SCOT的修饰程度。本项研究为探索糖尿病情况下线粒体蛋白质的氧化修饰状态与糖尿病心肌病的相关性提供了一条新的思路。